SPR親和力測定服務
基于表面等離子體共振SPR原理為客戶提供準確、快速的親和力測定服務。表面等離子體共振 (SPR親和力測定)測定是一種基于光學的無標記檢測技術,用于實時檢測兩個或多個分子之間的分子互作。SPR親和力測定的平臺吞吐量、靈活性和靈敏度使研究人員有可能在任何結合中研究,包括:抗原抗體親和力檢測,蛋白與小分子、多肽親和力檢測,蛋白與小分子藥物的親和力檢測等??梢匝芯糠秶鷱V泛的分子,從離子、片段和小分子到蛋白質和病毒。 為客戶提供1-2周的快速親和力檢測周期,為客戶提供準確、有效的親和力測定數據,為客戶的實驗項目提供強有力的保障。
表面離子共振(SPR)
表面等離子體共振 (SPR)親和力測定是一種基于光學的無標記檢測技術,用于實時檢測兩個或多個分子之間的分子互作。SPR親和力測定具有高通量、高靈活性、高靈敏度的特點,可以用于早期的藥物研發以及臨床前藥物篩選。比如:篩選小分子藥物或多肽(酶或抗體等)具有強大的優勢能夠快速、準確地篩選出候選藥物分子為后續研究節省成本。
SPR親和力檢測是一種通過傳感器芯片跟蹤信號變化來檢測分子相互作用的方法。SPR信號通過折射率變化呈現,它指的是響應單位 (RU) 大約相當于1pg/mm2的蛋白質表面濃度。在兩個分子之間的相互作用過程中,隨時間繪制SPR信號會產生傳感圖,該圖可以實時可視(圖 1)。一般結合反應包括三個階段:結合、平衡和解離;將這些傳感圖數據與數學模型擬合,科學家們可以計算關聯 (Ka) 和解離 (Kd) 速率常數,并最終確定結合親和力(KD)。與基于平衡點測量抗體結合親和力的等溫量熱法 (ITC) 不同,SPR可以獲得完整的動力學參數來評估結合和解離的所有影響以及抗體親和力。
在抗體親和力測量中,待分析的抗體首先被固定在傳感器芯片表面的高親和力抗IgG 抗體捕獲。然后將一系列濃度的抗原依次注射到整個表面。根據傳感圖曲線,人們可以根據動力學參數對抗體進行排序,并選擇具有優質特性的單克隆抗體。與緊密結合抗體的發現相比,特定區域(表位)的鑒定在藥物發現中有前景,因為通過標準的蛋白工程方法可以使結合親和力成熟。因此,基于涉及兩種結合反應的二價分析物模型,我們能夠提供分析來鑒定與兩種不同抗原表位結合的抗體。首先將通用抗體(如兔抗小鼠免疫球蛋白)共價連接到芯片表面,然后第一抗體被先前連接的通用抗體捕獲。不飽和位點被封閉后,注射的抗原將與第一抗體結合,形成Ab-Ag復合物。隨后施用于評估結合親和力的第二單克隆抗體,如果第二抗體結合不同的單獨表位,將觀察到特有的傳感圖曲線。

圖1 表面離子共振法原理圖
應用范圍:
我們提供通過SPR分析研究的生物分子相互作用的服務。
通過SPR研究各種生物實體,包括小分子 (<100 Da) 、蛋白質、核酸、脂質、細菌、病毒和全細胞。大多數已發表的SPR研究涉及蛋白質-蛋白質相互作用,其中抗體-抗原相互作用代表了一個主要方向。我們提供高靈敏度的儀器和準確的實驗方案,幫助客戶進行小分子、脂質和核酸的研究。蛋白質與較大實體(如全細胞和一些細菌和病毒)的相互作用受到漸逝波指數衰減的限制。在實踐中,可以有效地研究這些大分子,但獲得的信息可能僅限于定性或半定量(例如,相對排序)數據。
SPR親和力測定樣品要求:
客戶提供
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要求
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客戶可提供抗體,蛋白,多肽,化合物小分子等樣品
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* 緩沖液:PBS,HEPPS等不含有機試劑,不含Tris
* 抗原樣品:蛋白(多肽)>2mg,濃度>0.5mg/ml,純度>90%
* 蛋白樣品(含抗體):>200ug,濃度>0.5mg/ml,純度>90%
* 多肽樣品:>200ug,濃度>1mg/ml,純度>90%
* 化合物小分子:>1mg,濃度>1mg/ml(干粉最佳)
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SPR親和力測定服務聯系:
聯系方式:18071542101
聯系郵箱:vapolbio@163.com